Шкала установлена в плоскости полевой диафрагмы окуляра увеличением 10 крат. Окуляр со шкалой устанавливается в окулярный тубус. Парный ему окуляр без шкалы установить в окулярный тубус с диоптрийной подвижкой. Наблюдая в окуляр со шкалой, сфокусироваться на резкое изображение шкалы, затем рукоятками грубой и точной фокусировки сфокусировать микроскоп на резкое изображение объекта. Наблюдая изображение объекта вторым глазом в окуляр без шкалы, вращением кольца диоптрийной подвижки тубуса добиться резкого изображения объекта, при этом не изменять положение рукояток грубой и точной фокусировки. Наблюдая изображение объекта двумя глазами, раздвинуть окулярные тубусы так, чтобы видимые поля в левом и правом тубусах наблюдались как одно, то есть установить их в соответствии глазной базой. При такой настройке наблюдатель увидит резкое изображение объекта одновременно с резким изображением шкалы окуляре, что позволит выполнить необходимые сравнительные оценки линейных размеров структур.
Для определения размеров структур в линейной мере (в миллиметрах или микронах) необходимо воспользоваться объектом-микрометром. Объект-микрометр следует положить на предметный столик вместо объекта (на прямых микроскопах шкалой вверх, на инвертированных — шкалой вниз). По шкале объект-микрометра произвести градуировку шкалы окуляра для каждого объектива, с которым будут выполняться измерения. Для этого сфокусировать микроскоп на резкое изображение шкалы объект-микрометра в плоскости окуляра и развернуть окуляр в тубусе, установив штрихи обеих шкал параллельно. Определить, сколько делений объект-микрометра укладывается в шкале окуляра (при объективах среднего и большого увеличения) или сколько делений шкалы окуляра занимает весь объект-микрометр (при объективах малого увеличения).
Вычислить цену деления шкалы окуляра при работе с каждым объективом по формуле:
Е = Т * L / A, где
E — цена деления шкалы окуляра;
L — число делений объект-микрометра;
Т — цена деления шкалы объект-микрометра, указанная на объект-микрометре;
А — число делений шкалы окуляра.
Полученные данные рекомендуется записать в таблицу. Пользуясь этими данными при определении истиной линейной величины объекта достаточно подсчитать число делений шкалы окуляра, накладывающихся на измеряемый участок объекта, и умножить это число на цену деления шкалы, указанную в данной таблице.
